四臂昆虫嗅觉仪·斜纹夜蛾行为测定

一、实验条件

- 温度：25±1 ℃，湿度：65%±5%

- 光照：弱红光 / 黑暗（夜蛾避光、忌强光，白光会抑制求偶与气味趋性）

- 环境：静音、无震动、无杂味

- 气流：单臂180–220 mL/min，气流柔和、不吹飞虫体

- 试虫：羽化1–3日龄健康成虫，雌雄分开测定，实验前饥饿3–5 h，不喂食蜂蜜

二、气路连接

前置高分子过滤器→活性炭除味→流量计→加湿瓶→四臂嗅觉仪→真空泵

通气稳定15 min，建立稳定气味梯度。

三、样品制备

1. 滤纸1×2 cm，单张滴加5–15 μL植物挥发物、性信息素、精油、提取物

2. 对照臂加入同等体积空白溶剂（正己烷/乙醇）

3. 自然挥发30 s后接入气路

4. 处理臂、对照臂交替排布

四、臂位分组（固定通用方案）

- 臂1、臂3：待测气味（处理组）

- 臂2、臂4：纯溶剂（空白对照）

- 每组结束随机调换臂位，消除位置偏好

五、实验操作步骤

1. 斜纹夜蛾低温冷藏轻微麻醉（4℃冷藏3 min），避免剧烈挣扎损伤翅鳞

2. 软毛刷轻柔挑虫，单次投放8–12头成虫

3. 中央释放室放入，快速密封遮光

4. 前5 min适应期，不统计数据

5. 正式观测计时：15–20 min

6. 统计标准：各臂停留＞45 s虫数、中心滞留虫数

六、清洗规范

1. 每组实验立刻更换滤纸

2. 嗅觉仪玻璃腔体乙醇擦拭、纯水冲洗、风干

3. 更换不同气味前，空机通气30 min除残留

4. 每组≥6次生物学重复，试虫只用一次

七、数据计算公式

八、斜纹夜蛾专属质控要点

1. 成虫翅鳞极易脱落，禁止酒精直接喷虫体，仅低温镇静

2. 极度畏光，全程必须黑暗/弱红光，严禁白光

3. 雌蛾偏好植物气味、雄蛾偏好性信息素，必须雌雄分开

4. 气流不能偏大，大风会导致夜蛾紧贴管壁不动

5. 实验室内不能有人工花香、香水、有机溶剂杂味